檢測(cè)器是利用樣品的某一物理或化學(xué)性質(zhì)與流動(dòng)相有差異的原理,當(dāng)樣品隨流動(dòng)相從色譜柱流出經(jīng)過(guò)檢測(cè)器時(shí),會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)相背景值發(fā)生變化,通過(guò)將變化的光學(xué)或其他信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào),從而在色譜圖上以色譜峰的形式記錄下來(lái)。
液相色譜中常用到的
色譜檢測(cè)器有紫外-可見(jiàn)光檢測(cè)器,熒光檢測(cè)器,示差折光檢測(cè)器,蒸發(fā)光散射檢測(cè)器,質(zhì)譜檢測(cè)器等。
1.紫外-可見(jiàn)光檢測(cè)器(UV-VIS),用來(lái)檢測(cè)帶有發(fā)色基團(tuán)的化合物,這些化合物往往帶有不飽和鍵或未共用電子對(duì)。
2.熒光檢測(cè)器(FLD),有些化合物被紫外光照射后會(huì)發(fā)出比紫外光波長(zhǎng)更長(zhǎng)的光,即熒光,其靈敏度比UV更高。
3.示差折光檢測(cè)器(RID),是通過(guò)連續(xù)測(cè)定色譜柱流出液折射率的變化而對(duì)樣品濃度進(jìn)行檢測(cè)的。通用型檢測(cè)器,對(duì)沒(méi)有紫外吸收的物質(zhì)(如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等)。在制備色譜中也常用到,因?yàn)槠洳粫?huì)改變通過(guò)其檢測(cè)的樣品性質(zhì)。
由于介質(zhì)的折光率會(huì)隨溫度升高為降低,因此RI的信號(hào)響應(yīng)對(duì)環(huán)境溫度很敏感;流動(dòng)相的比例變化也會(huì)影響折光率,因此RI只能走等度洗脫。
4.蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD),是基于溶質(zhì)的光散射性質(zhì)的檢測(cè)器,色譜柱流出液導(dǎo)入霧化器,被載氣霧化成小液滴,液滴通過(guò)加熱漂移管時(shí),流動(dòng)相中的溶劑被蒸發(fā)掉,只留下溶質(zhì),激光束照在溶質(zhì)顆粒上產(chǎn)生光散射,光收集器收集散射光并通過(guò)光電倍增管轉(zhuǎn)變成電信號(hào)。
ELSD屬通用型和質(zhì)量型檢測(cè)器,適合于無(wú)紫外吸收、無(wú)電活性和不發(fā)熒光的樣品的檢測(cè)。與RI類似,相比RI,ELSD對(duì)環(huán)境溫度不敏感,流動(dòng)相可以走梯度,而用于制備色譜時(shí)需要分流,因?yàn)檫M(jìn)入ELSD的樣品大部分會(huì)發(fā)生變質(zhì)且無(wú)法回收。
5.質(zhì)譜檢測(cè)器(MSD),是通過(guò)對(duì)樣品的離子的質(zhì)荷比的分析而實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品進(jìn)行定性和定量的一種方法。因此,質(zhì)譜儀都必須有電離裝置把樣品電離為離子,有質(zhì)量分析裝置把不同質(zhì)荷比的離子分開(kāi),經(jīng)檢測(cè)器檢測(cè)之后可以得到樣品的質(zhì)譜圖。